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核酸提取纯化和浓缩方法应该选
作者:专题报道 发布时间:2024-09-27 23:39:07

  世纪诞生以来,分子生物学快速地发展并在整个生命科学领域广泛渗透和应用,推动了传统医学进入基于分子层面实验科学的现代生物医学时代。

  核酸提取和纯化是分子生物学试验的基础,在以下应用实验中都有必要进行核酸提取:

  DNA提取方法:酚氯仿抽法,主要是使用两种不同的有机溶剂交替抽提将蛋白去除。通过苯酚氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后,在水相中主要溶解的是以DNA为主的核酸成分,在有机相中主要是多糖和脂类物质,蛋白质则沉淀于两相之间。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含核酸的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀核酸,之后再离心分离和溶解洗脱,最后通过将洗涤后的核酸沉淀进行浓缩干燥即可得到高纯度核酸。

  DNA,而RNA和蛋白质顺利通过。硅胶膜表面的硅醇基团呈弱酸性,其水化后带负电。当溶液中存在一定浓度的阳离子后,形成的阳离子桥能够中和DNA和硅醇基团之间的表面负电荷,从而使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面。反之,处于低盐水溶液状态下时,由于硅胶膜的硅醇基团与DNA磷酸基团之间的静电排斥,硅胶膜释放DNA。

  PH结合核酸,低盐高PH值洗脱,来分离纯化核酸。离心柱纯化也是试剂盒提取中广泛的使用方法。

  运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表明上进行改良和表面修饰后,该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。磁珠法利用了磁性颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理,先使用细胞裂解液裂解细胞,带有活性基团的磁性颗粒可特异性吸附从细胞中游离出来的核酸分子,而样品中的其他干扰物则很好的移除了,在磁场作用下,磁性颗粒与液体分开完成,最后回收颗粒(即磁珠

  -DNA混合物),再用洗脱液洗脱,纯化浓缩后即可得到纯净的DNA,获得质量较高的核酸模板。

  DNA样品。DNA沉淀后可能会含水或水/乙醇混合液,浓缩去除后能够获得干燥的DNA样品。

  WTCHG(牛津大学人类遗传学威康信托中心)使用Sequenom MassARRAY®SNP基因分型系统用于SNP分析,样品前制备过程分别使用风干(左)和Genevac EZ-2真空离心浓缩仪(右)干燥含有寡核苷酸样品的384孔板。

  EZ-2真空离心浓缩仪干燥寡核苷酸样品,可以大幅度降低样品降解率,保证样品不会被污染,消除了样品损坏的潜在来源。

  DNA样本,Genevac真空离心浓缩仪是合适的选择,Genevac系统大范围的应用于DNA样品制备与纯化处理,不论是处理PCR前的简单的小体积浓度DNA pellets,还是高通量处理许多纯化DNA或寡核苷酸的样品,都有不同的机型可供选择。

  Genevac是德祥集团资深合作伙伴之一。英国Genevac公司成立于1990年,隶属SP Scientific旗下,一直专注于研究和生产各种离心蒸发浓缩设备,其产品大范围的应用于生命科学、制药、化学、分析等领域。

  1992年,总部在中国香港特别行政区,分别在越南、广州、上海、北京设立分公司。主要服务于大中华区和亚太地区——在亚太地区有27个办事处和销售网点,5个维修中心和2个样机实验室。

  30多年来,德祥一直深耕于科学仪器行业,主要营业产品有实验室分析仪器、工业检验测试仪器及过程控制设备,致力于为新老客户提供更完善的解决方案。公司业务包含仪器代理,维修售后,实验室咨询与规划,CRO冻干工艺开发服务以及自主产品研制、生产、销售、售后。与高校、科研院所、政府机构、检验机构及有名的公司保持密切合作,服务客户覆盖制药、医疗、商业实验室、工业、环保、石化、餐饮和电子等各个行业及领域。

  2009至2021年间,德祥先后荣获了“最具影响力经销商”、“年度最佳代理商“、”年度最高销售奖“等殊荣。我们始终秉承诚信经营的理念,致力于成为优秀的科学仪器供应商,为此我们从未停止前进的脚步。