常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法（Trizol法）、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强，尤其适合小样本及特别难提取的组织，如皮肤，动物结缔组织等总RNA的提取；另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂，还能够适用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法，电泳条带较为均一，但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合，在磁场作用下，磁珠-核酸复合物与液体分离，再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还能够正常的使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解，保证RNA质量？

  内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时，内源性RNA酶释放，降解RNA，降解速度与酶含量和温度有关，所以收集样本时一定要马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法：①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存；②立即切成小块投入液氮中保存；③使用RNAlater保护剂等。

  使用无RNase的塑料制品和枪头，玻璃器皿要消毒避免交叉污染，注意：戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套，在清洁灰尘少的试验台提取。

  选用新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好；如果不是新鲜的(最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的)组织，注意别反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，待组织解冻后，用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，进行匀浆处理。注意：速度不要太快，要有间隙，否则由于摩擦产热，RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取，也要这样做，更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。

  贴壁细胞，需要先用胰酶消化后，然后收集到离心管中，离心，去上清然后用PBS多洗2-3次，以去除多余的胰酶。悬浮细胞，直接用吸管或者加样枪吹打，以使细胞基本能被吹下来。然后离心去上清，不需要用PBS洗。

  RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度：

  1）通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带，28s条带宽度为18s条带的两倍；

  2）通过色谱方法检验测试，RIN值：28s/18s为1.8-2.0，表明RNA完整性较好，基本无降解发生。

  ☑28s亮度是18s亮度的一倍，其他比例关系均提示RNA有某些特定的程度的破坏。

  ☑不能有多的带出现，出现多的带有两个可能:一是DNA污染带;二是rRNA破坏断裂带。

  ☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失，无显著的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染，而且是很大量的 DNA污染。

  Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，配备高品质温度模块，采用光纤和CMOS的检测系统，高能LED的激发，提供高灵敏和可靠的数据。

  中国食品药品检定研究院1018.00万元采购有机元素分析,核酸蛋白分析,核磁共振,自动进样器,PCR

  青年才俊汇集 高端学术交流 第十八届全国青年分析测试学术报告会暨青委会换届大会在桂林召开

  新品发布！普源精电DHO5000 系列与DG5000 Pro系列重磅登场

  展会邀请-艾普拜生物邀请您参加2024 IVD China体外诊断创新展

  快速荧光定量PCR扩增酶预混液(UNG, 2×)让qPCR实验so easy

  多重数字PCR活菌检测：naica®数字PCR系统助力霍乱弧菌活菌绝对定量

  邀请函中国海洋湖沼学会水环境分会、中国环境科学学会海洋环境保护专业委员会2023年学术年会

  创新引领 YOUNG帆起航——仪器信息网25周年 我们不一YOUNG！

  Gene-数字PCR学堂—Drop-off方法检验测试基因缺失篇

  全新的荧光观察交互体验，Revolve Generation2正倒置一体电动荧光显微镜颠覆登场

  Azure Cielo 实时荧光定量PCR系统可快速可靠地检测新冠病毒

  文献速递 naica️微滴芯片数字PCR系统帮助探寻过往肝病石蜡样本与新发现病毒关系

  肿瘤负荷监测｜naica微滴芯片数字PCR系统定量ctDNA中特异性SV监测肿瘤治疗反应和复发

  【Seminar】naica六色微滴芯片数字PCR系统来进行表观遗传学和基因编辑检测